Pecyn RT-qPCR ForeDirect
Disgrifiad
Mae ForeDirect RT-qPCR Kit wedi'i gynllunio ar gyfer ymhelaethu amser real uniongyrchol RNA o gasgliadau swab heb brosesau puro RNA.Mae'r pecyn hwn yn cwblhau'r cylchoedd qRT-PCR o fewn awr.Mae'r cymysgedd ensymau yn gyfuniad wedi'i optimeiddio o Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymeras, atalydd RNase.Mae'r Byffer Adwaith yn cynnwys yr holl gydrannau gofynnol, gan gynnwys cydrannau clustogi wedi'u optimeiddio, Mg2+, dUTP, a dNTPs.
Manylebau
100T
Cydrannau Kit
Asiant rhyddhau asid niwcleig |
Amddiffynnydd RNA |
Clustogi 2 × RT-qPCR |
Cymysgedd Ensym (Taq&M-MLV) |
Cyfarwyddiadau |
Cais PCR
1. Ar ôl i'r tiwbiau adwaith PCR gael eu centrifugio'n fyr, rhowch nhw yn y tanc sampl o offeryn ymhelaethu.
2. protocol thermol
Cam | Tymheredd | Amser | Beiciau | |
1 | Trawsgrifiad o'r cefn | 50 ℃ | 15 mun | 1 |
2 | Cyn-denatureiddio | 95 ℃ | 1 mun | 1 |
3 | Dadnatureiddio | 95 ℃ | 10 eiliad | 42 |
4 | Anneal / Estyniad | 60 ℃ | 30 eiliad |
Nodyn:Canfuwyd signal fflwroleuol yn syth ar ôl cam ymestyn pob cylchred.
3. Ar ôl gosod, arbed y ffeil a rhedeg y rhaglen adwaith.
Camau Gweithredu
Cyn paratoi'r adweithydd, dylid dadmer yr holl adweithyddion yn y pecyn ar dymheredd yr ystafell a'u cymysgu'n ysgafn.
Paratoi adweithydd
1. Paratowch y Cymysgedd Rhyddhau Asid Niwcleig
Cydran | Cyfaint fesul Sampl neu Reolaeth |
Asiant rhyddhau asid niwcleig | 5μL |
Amddiffynnydd RNA | 0.5 μL |
2. Paratowch y Cymysgedd Adwaith
Cydran | Cyfaint fesul Sampl neu Reolaeth |
Clustogi 2 × RT-qPCR | 15 μL |
Cymysgedd Ensym (Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
Preimwyr a Holwyr | 1μL |
Storio ac Oes Silff
-Dylid storio'r pecyn ar -20± 5℃.Y cyfnod dilysrwydd yw 12 mis.
-Osgoi cylchoedd rhewi-dadmer dro ar ôl tro (<5 cylch).