• facebook
  • yn gysylltiedig
  • youtube

Gwirio perfformiad paent preimio a stilwyr yng nghyfnod cynnar adweithyddion PCR a phennu'r amodau adwaith mwyaf addas yw'r rhagofynion i sicrhau cynnydd llyfn arbrofion ffurfiol.

Felly sut mae angen i ni gadarnhau'r chwiliwr paent preimio yn y cyfnod cynnar?

Y prif ddangosyddion yw llinell sylfaen, cromlin ymhelaethu, gwerth ct, effeithlonrwydd ymhelaethu, canfod sampl crynodiad isel, CV, ac ati.

Llinell sylfaen

Y llinell sylfaen yw'r llinell lorweddol yn y gromlin ymhelaethu PCR.Yn yr ychydig gylchoedd cyntaf o'r adwaith mwyhau PCR, nid yw'r signal fflworoleuedd yn newid llawer ac yn ffurfio llinell syth.Y llinell syth hon yw'r llinell sylfaen.

Wrth sgrinio stilwyr preimio PCR, rhowch sylw i weld a yw'r llinell sylfaen yn wastad.Bydd purdeb crynodiad y stiliwr paent preimio yn effeithio ar y llinell sylfaen, fel achosi i'r llinell sylfaen godi neu ostwng.Mae'r llinell sylfaen hefyd yn ddangosydd greddfol iawn.
Dadansoddi

Cromlin Ymhelaethiad

Dangosydd greddfol arall yw siâp y gromlin ymhelaethu.Mae'n well cael cromlin siâp S i osgoi chwyddo eilaidd neu gromliniau chwyddo annormal eraill.
null

Gwerth Ct

Nifer y cylchoedd sy'n cyfateb i'r pwynt ffurfdro o'r llinell sylfaen i'r twf esbonyddol yw'r gwerth Ct.

Ar gyfer yr un sampl, mae gwahanol chwiliedyddion preimio yn arwain at gromliniau ymhelaethu gwahanol, a bydd y gwerth Ct cyfatebol yn cael ei effeithio gan effeithlonrwydd ymhelaethu a gradd ymyrraeth.Mewn theori, y lleiaf yw gwerth Ct y stiliwr paent preimio a ddewiswn, gorau oll.

Dadansoddiad-3

Effeithlonrwydd Ymhelaethu

Un o'r dulliau mwyaf dibynadwy a sefydlog ar gyfer gwerthuso effeithlonrwydd ymhelaethu PCR yw'r gromlin safonol, sydd hefyd yn cael ei gydnabod yn eang gan ymchwilwyr.Mae'r dull yn cynnwys gwneud cyfres o samplau i reoli nifer cymharol y templedi targed.Mae'r samplau hyn fel arfer yn cael eu gwneud gan wanhau cyfresol o atebion stoc crynodedig, y mwyaf cyffredin a ddefnyddir yw gwanhau 10-plyg.Gan ddefnyddio cyfres o samplau gwanedig, gan ddefnyddio rhaglen qPCR safonol i ymhelaethu i gael y gwerth Cq, ac yn olaf lluniwch gromlin safonol yn ôl crynodiad pob sampl a'r gwerth Cq cyfatebol i gael yr hafaliad llinol Cq= -klgX0+b, a'r effeithlonrwydd ymhelaethu E=10(-1 /k)-1.Wrth ddefnyddio qPCR ar gyfer dadansoddiad meintiol, mae'n ofynnol i'r effeithlonrwydd ymhelaethu fod yn yr ystod o 90% -110% (3.6>k> 3.1).

Dadansoddiad-4

Canfod Samplau Crynodiad Isel

Pan fo crynodiad y sampl yn isel, mae cyfraddau canfod gwahanol stilwyr paent preimio yn wahanol.Rydym yn dewis 20 sampl crynodiad isel i'w hailadrodd, a'r system preimio gyda'r gyfradd ganfod uchaf yw'r gorau.

Dadansoddiad-5

Cyfernod Amrywiad (CV)

Gellir canfod 10 sampl dyblyg gyda gwahanol chwiliedyddion preimio yn unol â safon llinell yr adweithydd ar gyfer canfod mwyhad asid niwclëig.

Dadansoddiad-6

Adweithyddion meintiol:
Cywirdeb
Dylai'r cywirdeb o fewn un swp fodloni: y cyfernod amrywiad (CV,%) o werth logarithmig y crynodiad prawf yw ≤5%.Pan fo crynodiad y sampl yn isel, cyfernod amrywiad (CV,%) logarithm y crynodiad canfod yw ≤10%


Adweithyddion ansoddol:
Cywirdeb
Dylai'r cywirdeb o fewn un swp fodloni:

(1) Cyfernod amrywiad gwerth Ct (CV,%) ≤5%

Profir yr un sampl yn gyfochrog am 10 gwaith, a dylai canlyniadau'r prawf fod yn gyson


Amser post: Medi 18-2021