Mae'r dadansoddiad canlynol o broblemau posibl ynBuccalswab /FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

Mae'r golofn puro yn rhwystredig

Yn y pecyn hwn, yn y gweithrediad echdynnu DNA genomig, mae'r golofn puro yn cael ei arsugnu'n uniongyrchol ar y cymysgedd lysis enzymatig sampl heb gam centrifugio, a gall y golofn puro gael ei rhwystro oherwydd enzymization anghyflawn a gludedd uchel y sampl.

Mae'r achosion posibl canlynol fel a ganlyn:

1. Treuliad ensymatig anghyflawn o samplau meinwe.

Argymhelliad: Gellir ymestyn amser prosesu sampl Foregene Protease yn briodol neu gellir cymryd y supernatant ar ôl centrifugio ar 12,000 rpm (~ 13,400× g) am 5 munud.

2. Defnydd gormodol o samplau meinwe neu feinweoedd mawr.

Argymhelliad: Mae'n well peidio â bod yn fwy nag 1Buccal swab yn y sampl;os yw'r sampl yn rhy fawr, cynyddwch y dos o Buffer ST1, Foregene Protease, byffer ST2 yn unol â hynny.

3. y gludedd sampl yn rhy uchel.

Argymhelliad: Gellir gwanhau samplau yn briodol gyda 10 mM o Tris-HCl cyn echdynnu DNA genomig.

4. Mae darnau o'r cerdyn gwaed wedi'u sugno.

Argymhelliad: Gellir ymestyn amser centrifugation dros dro cam 6 o echdynnu genomig sbot gwaed (Cerdyn FTA) yn briodol.

Cnwd isel neu ddim DNA

Yn aml mae amrywiaeth o ffactorau sy'n effeithio ar gynnyrch DNA genomig, gan gynnwys tarddiad sampl, amodau storio sampl, paratoi sampl, trin, ac ati.

Ni ellir cael DNA genomig yn ystod echdynnu

Mae'r achosion posibl fel a ganlyn:

1. Mae cadw samplau yn amhriodol neu eu storio am gyfnod rhy hir yn arwain at ddiraddio DNA genomig.

Argymhelliad: Yn ddelfrydol, dylid samplu swabiau geneuol yn ffres, ac nid yw'n ddoeth defnyddio swabiau cadw ar gyfer gweithrediadau echdynnu DNA genomig;dylai samplau sbot gwaed sicrhau bod yr ansawdd yn gymwys ac ni ddylai'r amser storio fod yn rhy hir.

2. Gall defnydd rhy ychydig o feinwe arwain at ddim echdynnu'r DNA genomig cyfatebol.

Argymhelliad: Dilynwch ybwcal cyfarwyddiadau samplu swab yn y canllaw llawdriniaeth, a sychwch gymaint o weithiau â phosibl fel y gellir cysylltu digon o gelloedd â'r swab llafar ar gyfer echdynnu DNA genomig;ar gyfer echdynnu sampl sbot gwaed, gellir cynyddu'r ardal torri sbot gwaed yn briodol.

3. Mae Foregene Proteas wedi'i gadw'n amhriodol, gan arwain at leihad yn ei weithgarwch neu ei anactifadu.

Argymhelliad: Cadarnhau amodau storioyr Foregene Protease neu roi Foregene Protease newydd yn ei le ar gyfer adwaith ensymatig.

4. Mae cadw'r pecyn neu'r amser storio yn amhriodol yn rhy hir, gan arwain at fethiant rhai cydrannau yn y pecyn.

Argymhelliad: Prynu un newyddBuccal swab DNAynysu pecyn ar gyfer gweithdrefnau cysylltiedig.

5. Nid yw Buffer WB yn ychwanegu ethanol absoliwt.

Argymhelliad: Cadarnhewch fod byffer WB yn ychwanegu'r cyfaint cywir o ethanol absoliwt.

6. Nid yw'r eluent yn cael ei ychwanegu'n gywir at y ffilm silicon.

Argymhelliad: Ychwanegu 65°Ccynhesu eluent yn disgyn i ganol y bilen silicon a gadael ar dymheredd ystafell am 5 munud i gynyddu effeithlonrwydd elution.

LDNA genomig ow-cynnyrch ynysig

Mae'r achosion posibl canlynol fel a ganlyn:

1. Mae cadw samplau yn amhriodol neu eu storio am gyfnod rhy hir yn arwain at ddiraddio DNA genomig.

Argymhelliad: Yn ddelfrydol, mae swabiau geneuol yn cael eu samplu'n ffres, ac ni ddylid defnyddio swabiau wedi'u cadw ar gyfer echdynnu DNA genomig.

2. Os yw maint y sampl meinwe yn rhy fach, bydd y cynnwys DNA genomig a echdynnwyd yn llai.

Argymhelliad: Dilynwch y cyfarwyddiadau samplu swab llafar yn y canllaw gweithredu, gan sychu cymaint o weithiau â phosib fel y gellir cysylltu digon o gelloedd â'r swab llafar ar gyfer echdynnu DNA genomig.

3. Mae Foregene Proteas wedi'i gadw'n amhriodol, gan arwain at leihad yn ei weithgarwch neu ei anactifadu.

Argymhelliad: Cadarnhau amodau storiothe Foregene Protease neu roi un newydd yn ei le Foregene Proteas ar gyfer adwaith ensymatig.

4. Problemau eluent.

Argymhelliad: Defnyddio Buffer EB ar gyfer elution;os yn defnyddio ddH₂O neu eluents eraill, cadarnhewch fod pH yr eluate rhwng 7.0-8.5.

5. Nid yw'r eluate yn cael ei ychwanegu dropwise yn gywir.

Argymhelliad: Ychwanegu diferion eluent i ganol y bilen silicon a gadael ar dymheredd ystafell am 5 munud i gynyddu effeithlonrwydd elution.

6. Mae'r hylif elution yn cronni rhy ychydig.

Argymhelliad: Defnyddiwch eluent ar gyfer elution DNA genomig fel sy'n ofynnol yn y cyfarwyddiadau, o leiafdim llai na 15μl.

Low purdeb of DNA genomigynysig

Gall purdeb DNA genomig isel arwain at fethiant neu ganlyniadau anfoddhaol o arbrofion i lawr yr afon, megis: ni ellir torri ensymau yn agored, ni all PCR gael y darn genyn o ddiddordeb, ac ati.

Mae'r achosion posibl fel a ganlyn:

1. Llygredd heteroprotein, llygredd RNA.

Dadansoddiad: Ni chafodd y golofn puro ei olchi gan ddefnyddio Buffer PW;ni chafodd colofn puro golchi PW Clustog ei olchi gan ddefnyddio'r cyflymder allgyrchol cywir.

Argymhelliad: Sicrhewch nad oes unrhyw wlybaniaeth yn yr uwchnatur cyn ychwanegu ethanol;gofalwch eich bod yn golchi'r golofn puro yn unol â'r cyfarwyddiadau, ac ni ellir hepgor y cam hwn.

2. llygredd ïon amhuredd.

Dadansoddiad: Cafodd colofn puro golchi Clustog WB ei hepgor neu ei olchi unwaith yn unig, gan arwain at halogiad ïonig gweddilliol.

Argymhelliad: Gwnewch yn siŵr eich bod yn golchi Buffer WB 2 gwaith yn ôl y cyfarwyddyd i gael gwared ar ïonau gweddilliol cymaint â phosib.

3. RNA halogiad ensym.

Dadansoddiad: Ychwanegwyd RNasau Tramor i'r byffer;Roedd gweithrediad golchi PW byffer yn anghywir, gan arwain at weddillion RNase, gan effeithio ar weithrediadau arbrofol RNA i lawr yr afon, megis trawsgrifio in vitro.

Argymhelliad: Cyfres Foregene asid niwclëigynysiggall citiau tion dynnu RNA heb ychwanegu RNase ychwanegol,felly Pecyn Ynysu DNA Cerdyn Swab/FTA buccalangen't ychwanegu RNase;gofalwch eich bod yn dilyn y cyfarwyddiadau ar gyfer Colofn puro golchi Buffer PW, ac ni ellir hepgor y cam hwn.

4. Gweddillion ethanol.

Dadansoddiad: Ni pherfformiodd Buffer WB centrifugation tiwb gwag ar ôl golchi'r golofn puro.

Argymhelliad: Perfformiwch y gweithrediad centrifugation tiwb gwag cywir yn unol â'r cyfarwyddiadau.

5. Llygredd amhuredd arall.

Dadansoddiad: Nid yw samplau wedi'u cadw neu samplau arbennig yn cael eu rhag-drin.

Argymhelliad: Rhag-driniwch y sampl yn drylwyr yn unol â'r cyfarwyddiadau.