Sefydlu PCR arbrawf SOP i safoni ymddygiad personél yr arbrawf.
Mae'r arbrofwr yn cadw'n gaeth at y gweithdrefnau gweithredu, ac yn lleihau'r llygredd PCR a allai gael ei achosi gan ffactorau dynol neu atal llygredd rhag digwydd.Yn ogystal, dylai fod gan yr arbrofwr y wybodaeth a'r sgiliau proffesiynol cyfatebol, gan gynnwys hyfedredd wrth weithredu offer cysylltiedig, egluro'r broses waith gyfan, meistroli dulliau trin halogiad a dulliau rheoli ansawdd labordy, a gallu dehongli canlyniadau'r profion yn gywir.
Sefydlu labordy PCR safonol.
Rhennir labordy PCR yn bedwar maes mewn egwyddor, sef ardal paratoi adweithydd, ardal brosesu sampl, ardal ymhelaethu, ac ardal dadansoddi cynnyrch ymhelaethu.Mae'r ddau faes cyntaf yn ardaloedd cyn ymhelaethu, ac mae'r ddau faes olaf yn ardaloedd ôl-ymhelaethu.Dylid gwahanu'r parth cyn ymhelaethu a'r parth ôl-ymhelaethu yn llym.Gall deunyddiau arbrofol, adweithyddion, papur recordio, beiros, deunyddiau glanhau, ac ati, lifo o'r ardal cyn ymhelaethu i'r ardal ôl-ymhelaethu yn unig, hynny yw, o ardal paratoi adweithydd → ardal brosesu sampl → ardal ymhelaethu → ardal dadansoddi cynnyrch ymhelaethu, a rhaid iddo beidio â llifo yn ôl.Dylai'r llif aer yn y labordy hefyd lifo o'r ardal cyn ymhelaethu i'r ardal ôl-ymhelaethu, ac nid llifo yn ôl.Dangosir y dyluniad labordy PCR delfrydol isod:
Ffigur A: Modd gosod labordy PCR delfrydol gyda phwysau negyddol yn yr ystafell glustogi
Ffigur B: Modd gosod labordy PCR delfrydol gyda phwysau positif yn yr ystafell glustogi
Dylai'r diagramau gosod labordy PCR a roddir yn Ffigur A a Ffigur B fod yn ddull gosod mwy delfrydol, a gall y labordy ag amodau gyfeirio at y modd hwn ar gyfer dylunio.Ar gyfer labordai cyffredin, argymhellir y gellir gwahanu'r ardal ymhelaethu PCR a'r ardal dadansoddi cynnyrch, a dylid lleihau agor y clawr gymaint â phosibl yn yr ardal paratoi sampl a'r ardal ymhelaethu PCR.Cofiwch: Mae cynhyrchion a chyflenwadau arbrofol yn yr ardal dadansoddi cynnyrch wedi'u gwahardd yn llym rhag cael eu cymryd i'r ardal paratoi sampl ac ardal ymhelaethu PCR.
Os mai dim ond canfod ac adnabod PCR y mae'r labordy yn ei wneud, argymhellir defnyddio PCR meintiol fflwroleuol yn lle PCR confensiynol.
Gellir casglu a dadansoddi canlyniadau canfod PCR meintiol fflworoleuedd gan signalau fflworoleuedd, felly nid oes angen agor y caead ar gyfer electrofforesis ar ôl yr adwaith, sy'n osgoi halogiad cynnyrch PCR a achosir gan ollyngiad cynhyrchion adwaith i ffurfio aerosolau.Os cynyddwch nifer yr agoriadau capiau yn ystod cam llwytho electrofforesis gel, mae halogiad aerosol yn debygol o ddigwydd.Argymhellir hyrwyddo'r defnydd o PCR meintiol a disodli PCR ansoddol yn raddol.
Defnyddir system halogi cynnyrch gwrth-PCR UNG ar gyfer yr adwaith PCR.
Mae'r system yn defnyddio dUTP yn lle dTTP.Ar ôl yr adwaith PCR, mae'r holl gynhyrchion PCR (darnau DNA) wedi'u hymgorffori â dUTP;yn y rownd nesaf o adwaith PCR, mae'r ensym UNG a ychwanegir at y system yn cael ei ddeor ar 37 ° C am 5 munud cyn PCR, a all ddiraddio'n benodol yr holl ddarnau DNA sy'n cynnwys dUTP, ac yna perfformio adwaith PCR.Gall hyn gael gwared yn llwyr ar yr halogiad aerosol a achosir gan gynhyrchion PCR.Dangosir yr effaith yn y ffigur isod:
Nodyn: Ar gyfer y gyfres PCR uniongyrchol, gallwch ddewis cynhyrchion cyfres y system halogi cynnyrch gwrth-PCR o ForegeneAwgrymu
Ar gyfer labordai sy'n cynnal profion genoteipio ar raddfa fawr, argymhellir yn gryf defnyddio system halogi cynnyrch gwrth-PCR UNG ar gyfer profi adweithyddion yn ogystal ag adeiladu labordai rhesymol.
Nodyn atgoffa: Ni all defnyddio'r system hon gael gwared ar yr halogiad cynnyrch PCR sydd eisoes wedi'i achosi.Felly, dylid defnyddio'r system UNG ar ddechrau'r prawf perthnasol, a dylid defnyddio'r system UNG ar gyfer ymhelaethu PCR, er mwyn atal halogi cynhyrchion PCR Gau positif.
Argymhellir defnyddio system Direct PCR-UNG Foregene wrth gynnal profion ar raddfa fawr, megis:
Plannu Deilen Uniongyrchol PCR Kit-UNG；
Plannu Hadau Uniongyrchol PCR Kit-UNG；
Pecyn PCR Uniongyrchol Meinwe Anifeiliaid-UNG；
Cynffon Llygoden Uniongyrchol PCR Kit-UNG；
Pecyn PCR Pysgod Sebra Uniongyrchol-UNG.
Mae'r gyfres hon o gitiau gan Foregenegall nid yn unig berfformio canfod PCR yn gyflym ac ar raddfa fawr, ond hefyd yn effeithiol atal a rheoli halogiad cynnyrch PCR.
Amser post: Mawrth-19-2021
