Mae profion labordy yn dechrau gyda chasglu samplau, a chasglu samplau yw'r hawsaf i'w anwybyddu.Y peth pwysicaf ar gyfer casglu sampl yw dewis y math cywir o sampl, defnyddio offer samplu priodol, a chynnal cludiant a phrosesu rhesymol.

Math I.Sample

Mae mathau cyffredin o samplau fel a ganlyn:

Gall y dull samplu gyfeirio at y manylebau technegol ar gyfer monitro amgylcheddol y coronafirws newydd yn y farchnad masnach amaethyddol (basâr)”:

1. Samplau swab o swabiau gwddf, dwylo, dillad a gwrthrychau eraill ymarferwyr: mae'n ofynnol defnyddio'r datrysiad cadw firws yn y tiwb samplu firws ac ymdreiddio'n llawn i'r swabiau cotwm samplu.Mae arwyneb y ddaear) yn cael ei gymhwyso dro ar ôl tro a'i rinsio am fwy na 3 gwaith.Ar yr un pryd, mae angen perfformio samplu dosbarthedig aml-bwynt ar wyneb y gwrthrych a samplwyd.

2. Samplau swab arwyneb bwyd: Ni ellir casglu samplau bwyd yn uniongyrchol.Dylid gwahanu'r bwyd sydd i'w gasglu yn ofalus a'i storio mewn bag samplu glân cyn casglu samplau swab.Mae'n ofynnol defnyddio'r toddiant cadw firws yn y tiwb samplu firws, ar ôl socian y swab cotwm samplu yn llawn, i arogli a rinsio wyneb y sampl bwyd dro ar ôl tro i'w gasglu fwy na 3 gwaith.Ar yr un pryd, mae angen perfformio samplu dosbarthedig aml-bwynt ar wyneb y sampl.

3. Samplau carthffosiaeth: Yn ôl dosbarthiad y system ddraenio yn y farchnad, dewiswch 2-3 lleoliad samplu carthffosiaeth, gan ganolbwyntio ar y casgliad rhwydwaith pibellau mewnol, cyfeiriad llif y dŵr i lawr yr afon, neu'r cysylltiad â'r rhwydwaith pibellau trefol.I gasglu sampl swab, trochwch ef yn y carthion gyda swab cotwm samplu i'w wneud yn arsugno'r carthffosiaeth a'i rinsio yn y tiwb samplu fwy na 3 gwaith.I gasglu samplau carthffosiaeth, defnyddiwch boteli plastig polyethylen i gasglu samplau dŵr carthion 30-500 mL;ar gyfer casglu carthffosiaeth â chyfaint sy'n fwy na 500 mL, gellir defnyddio bwcedi plastig polyethylen neu offer cyfoethogi arbennig sampl dŵr ar y safle.Ar yr un pryd, mae angen cynnal samplu dosbarthedig aml-bwynt ar gyfer y lleoliad samplu carthffosiaeth.

4. Samplau anifeiliaid: Ar gyfer anifeiliaid byw, gellir defnyddio swabiau samplu i gasglu swabiau arwyneb y corff, swabiau oroffaryngeal a swabiau rhefrol, a gellir casglu samplau carthion neu secretiad hefyd a'u cofnodi yn unol â hynny ar y daflen gofnodi.Ar gyfer samplau anifeiliaid sydd wedi cael eu croenio, ac ati, defnyddiwch swabiau cotwm i gasglu samplau swabiau arwyneb y corff a ceudod corff.Mae'n ofynnol defnyddio'r toddiant cadw firws yn y tiwb samplu firws i ymdreiddio'n llawn i'r swab cotwm samplu, ac yna ailadrodd cais arwyneb y sampl bwyd sydd i'w gasglu.Shabu fwy na 3 gwaith.Ar yr un pryd, mae angen perfformio samplu dosbarthedig aml-bwynt ar wyneb y sampl.

5. Offer eraill: cynwysyddion ar gyfer cludo a bridio anifeiliaid fel cewyll neu danciau pysgod.Yn gyntaf, arsylwi neu ddeall y mathau penodol o anifeiliaid sy'n cael eu storio a'u bridio yn y cynhwysydd, a chasglu samplau swab ar wal fewnol y cynhwysydd neu samplau hylif o'r cynnwys.

6.Collect samplau aerosol mewn ardaloedd lle mae pobl yn casglu, ardaloedd masnachu lleol wedi'u hawyru'n wael, swyddfeydd, ac ystafelloedd gorffwys.

II.Sampling offer
1. Tiwb casglu gwaed
Os bydd angen i chi wneud profion asid niwclëig a samplau gwrthgeulydd yn ddiweddarach, argymhellir defnyddio pibell waed gwactod sy'n cynnwys gwrthgeulydd EDTA i gasglu gwaed;ar gyfer samplau serwm, argymhellir defnyddio pibell waed gwactod heb wrthgeulo.

2. Swab samplu

Argymhellir defnyddio swabiau polypropylen yn lle swabiau alginad calsiwm neu swabiau â pholion pren, oherwydd gallant gynnwys sylweddau sy'n anactifadu rhai firysau ac yn atal profion PCR.Ni ellir defnyddio swabiau â phennau cotwm, oherwydd mae gan ffibrau cotwm arsugniad cryf o brotein ac nid ydynt yn hawdd eu tynnu i mewn i'r toddiant cadw dilynol.

Yn y “Manylebau Technegol ar gyfer Casglu Cymysg 10-mewn-1 a Chanfod Asidau Niwcleig Coronafeirws Newydd”, mae'n cael ei nodi'n glir “y dylai'r swab samplu fod wedi'i wneud o bolyester, neilon a deunyddiau alginad di-cotwm a di-galsiwm eraill, a dylai'r ddolen fod wedi'i gwneud o ddeunydd nad yw'n bren.Mae’r pwynt torri tua 3cm o ben y pen swab, sy’n hawdd ei dorri.”

Soniodd y CDC yn yr Unol Daleithiau hefyd “Defnyddiwch swabiau ffibr synthetig yn unig gyda siafftiau plastig neu wifren.Peidiwch â defnyddio swabiau alginad calsiwm neu swabiau gyda siafftiau pren,gan y gallant gynnwys sylweddau sy'n anactifadu rhai firysau ac yn atal profion PCR.

Ar hyn o bryd a ddefnyddir yn eang yw swab heidio neilon di-haint tafladwy wedi'i gyfuno â gwialen blastig.Mae gan y swab heidio â chyfradd amsugno a rhyddhau dŵr well.Yn ôl gwahanol safleoedd samplu, mae gan y pen swab hefyd wahanol feintiau a ffibrau.Y trwch.”

3. Sampl ateb cadwraeth cludo

Datrysiad cadw anactifadu firws: gall swm priodol o grynodiad halen guanidine ac amrywiaeth o gydrannau lysis firws lyse'r firws yn uniongyrchol i ryddhau asid niwclëig, anactifadu RNase a DNase, a sicrhau cywirdeb asid niwclëig, y gellir ei ddefnyddio ar gyfer canfod qPCR dilynol.Ni ellir ei ddefnyddio ar gyfer tyfu firws ac ynysu.

Toddiant cludo a chadw firws: yn cynnwys halwynau, asidau amino, fitaminau, glwcos a phrotein sydd eu hangen ar gyfer goroesiad y firws, a all gynnal gweithgaredd y firws.Gellir ei ddefnyddio ar gyfer echdynnu asid niwclëig a chanfod y firws yn y dyfodol, a gellir ei ddefnyddio hefyd ar gyfer tyfu a gwahanu'r firws.

4. tiwb cadw sampl a bag sampl

Dylai'r tiwb storio sampl fod yn diwb plastig di-haint gyda chap sgriw nad yw'n amsugno asid niwclëig.Dylai pob tiwb sampl gael ei orchuddio â bag sampl i atal y sampl rhag gollwng a halogi.

III.Sylweddau sy'n ymyrryd yn y sampl

Sylweddau ymyrryd mewn arbrofion PCR

1. ymyrraeth mewndarddol

Gall sylweddau sy'n bresennol yn y sampl corff ymyrryd â chanfod sylweddau eraill.

Gwaed:heme (> 1mg / ml), hemin (> 0.1ng / μl), triglyseridau, IgG, ac ati;

wrin:Wrea (20mM);

Stôl:polysacaridau planhigion, colate;

Meinwe:proteas, colagen;

Llaeth: proteas, ïon calsiwm;

Cyffuriau: gwrthfiotigau, cyffuriau gwrthfeirysol, hormonau, ac ati.

arall.

2. ymyrraeth alldarddol

Mae'n dod o sylweddau a all ymyrryd â chanfod sylweddau eraill in vitro.Ychwanegion a sylweddau enghreifftiol y gellir cysylltu â nhw wrth gasglu a phrosesu samplau:

Cyflenwadau prawf: gel gwahanu serwm, cynhwysydd casglu sampl a stopiwr rwber, cathetr, hylif fflysio cathetr, powdr maneg, ac ati.

Gwrthgeulo: heparin (>0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), ac ati;

Toddyddion organig: isopropanol (> 0.1 IU/ml), betaine, sulfoxide dimethyl, formamide, glyserin, PEG, ac ati;

Diheintyddion: alcoholau (ethanol> 1%), aldehydau, ffenolau (ffenolau> 0.2%), perocsidau, asidau cryf (HCL), alcalïau cryf (NaOH), ac ati;

Glanedydd:SDS (>0.005%);

Pridd: hwmws

Dyestuff: indigo

arall.

O dan amodau samplu awyr agored gwirioneddol, megis casglu samplau amgylcheddol, gall y samplau gynnwys amrywiaeth o sylweddau ymyrryd, ac mae cyfansoddiad sylweddau ymyrryd ym mhob lleoliad yn wahanol, sy'n ei gwneud yn ofynnol i arbrofion ymyrraeth PCR gael eu cynnal yn unol ag amodau lleol.

IV.Sampl amodau storio a chludo

Dylid anfon sbesimenau clinigol newydd eu casglu i'r labordy o fewn 2 i 4 awr ar ôl eu casglu ar 2°C i 8°C.Storio ar 4 ℃ o fewn 24 awr.Dylid profi sbesimenau a ddefnyddir ar gyfer ynysu firws a chanfod asid niwclëig cyn gynted â phosibl.Gellir storio sbesimenau y gellir eu profi o fewn 24 awr ar 4 ° C;dylid storio sbesimenau na ellir eu canfod o fewn 24 awr ar -70°C neu is (os na - Storiwch ar 70°C mewn oergell ar -20°C).

Crynodeb:Mae casglu, cludo a storio samplau yn safonol yn hanfodol ar gyfer profi dilynol.Mae negatifau ffug llawer o brofion labordy yn cael eu hachosi gan gasgliadau amhriodol, cludo a storio samplau sy'n arwain at ddiraddio asid niwclëig firaol.Fodd bynnag, mae llawer o labordai yn dal i anwybyddu pwysigrwydd samplu.Rwy'n gobeithio y gall yr erthygl hon ddeffro sylw pawb i samplu a gwneud samplu mwy gwyddonol a rhesymol!

Cynnyrch cysylltiedig:

Pecyn Canfod Asid Niwcleig Amrywiol SARS-CoV-2 (I) (Dull Ymchwilio Fflwroleuol Amlblecs PCR) - Ar gyfer Canfod Mutants o Brasil, De Affrica, a'r DU