Pecyn Ynysu DNA Planhigyn Genomig Pecynnau Puro DNA Planhigion Protocol Adweithyddion
Manylebau
50 Preps, 100 Preps, 250 Preps
Mae'r pecyn hwn yn defnyddio colofn DNA yn unig sy'n gallu rhwymo DNA yn benodol, proteas Foregene a system byffer unigryw, sy'n symleiddio puro DNA genomig planhigion yn fawr.Gellir cael DNA genomig o ansawdd uchel o fewn 30 munud, sy'n osgoi diraddio DNA genomig.
Y bilen gel silica DNA yn unig a ddefnyddir yn y golofn sbin yw deunydd newydd unigryw Foregene, a all rwymo'n effeithiol ac yn benodol i DNA, a gwneud y mwyaf o dynnu RNA, proteinau amhuredd, ïonau, polysacaridau, polyphenolau a chyfansoddion organig eraill.
Cydrannau cynnyrch
| Clustogi PL1, Clustogi PL2 |
| Clustog PW, Clustogiad WB, Clustog EB |
| Foregene Protease |
| Colofn DNA yn unig |
| Cyfarwyddiadau |
Nodweddion a manteision
■ Dim halogiad RNase: Mae'r Golofn DNA yn Unig a ddarperir gan y pecyn yn ei gwneud hi'n bosibl tynnu RNA o DNA genomig heb RNase ychwanegol yn ystod yr arbrawf, gan atal y labordy rhag cael ei halogi gan RNase alldarddol.
■ Cyflymder cyflym: Mae gan Foregene Protease weithgaredd uwch na phroteasau tebyg ac mae'n treulio samplau meinwe yn gyflymach.
■ Syml: gellir cwblhau'r gweithrediad echdynnu DNA genomig mewn 30 munud.
■ Cyfleus: Mae'r centrifugation yn cael ei berfformio ar dymheredd ystafell, nid oes angen centrifugation tymheredd isel 4 ℃ na dyddodiad ethanol o DNA.
■ Diogelwch: nid oes angen adweithydd organig.
■ Ansawdd uchel: Mae gan y DNA genomig wedi'i buro ddarnau mawr, dim RNA, dim RNase, a chynnwys ïon hynod o isel, yn gallu bodloni gofynion amrywiol arbrofion.
Cais cit
Yn addas ar gyfer echdynnu a phuro DNA genomig o feinweoedd planhigion ffres neu wedi'u rhewi.
Llif gwaith
Diagram
Storio ac Oes Silff
Gellir storio'r pecyn am 12 mis ar dymheredd ystafell (15-25 ℃) a 2-8 ℃ am amser hirach.
Mae gan ateb Foregene Protease Plus fformiwla unigryw, sy'n weithredol pan gaiff ei storio ar dymheredd yr ystafell am amser hir (3 mis);bydd ei weithgaredd a'i sefydlogrwydd yn well pan gaiff ei storio yn4 ℃, felly argymhellir ei storio ar 4 ℃, cofiwch beidio â storio ar -20 ℃.
Canllaw Dadansoddi Problem
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Cnwd isel neu ddim DNA
Fel arfer mae yna lawer o ffactorau sy'n effeithio ar gynnyrch DNA genomig, gan gynnwys ffynhonnell y sampl, oedran y sampl, amodau storio'r sampl, a'r gweithrediad.
Ni ellid cael DNA genomig yn ystod echdynnu
1. Mae'r samplau meinwe yn cael eu storio'n amhriodol neu eu storio am gyfnod rhy hir, gan arwain at ddiraddio'r DNA genomig.
Argymhelliad: Storio samplau meinwe mewn nitrogen hylifol neu -20°C;ceisio defnyddio samplau sydd newydd eu casglu ar gyfer echdynnu DNA genomig.
2. Gall rhy ychydig o swm y sampl olygu na fydd y DNA genomig cyfatebol yn cael ei echdynnu.
Awgrym: Ar gyfer samplau meinwe sydd wedi'u storio ers amser maith neu sydd â diraddiad DNA genomig difrifol, gellir cynyddu nifer y samplau meinwe yn briodol er mwyn echdynnu DNA genomig sylweddol.Gellir pennu swm y sampl yn ôl yr anghenion DNA, ond ni ddylai'r sampl ffres fod yn fwy na 100mg, ac ni ddylai'r sampl sych fod yn fwy na 30mg.
3. Nid yw'r sampl yn ddaear gyda nitrogen hylifol na'i osod am gyfnod rhy hir ar ôl nitrogen hylifol.
Awgrym: Yn ystod echdynnu DNA, mae angen i'r sampl fod yn ddaear yn llawn gyda nitrogen hylifol i dorri'r wal gell;ar ôl ei falu, trosglwyddwch y powdr sampl i PL1 wedi'i gynhesu ymlaen llaw yn 65°C cyn gynted â phosibl (unwaith y bydd y powdr daear wedi toddi, bydd y DNA genomig yn dechrau diraddio'n gyflym).
4. Mae storio Foregene Protease yn amhriodol yn arwain at lai o weithgarwch neu anactifadu.
Argymhelliad: Cadarnhau amodau storio Foregene Protease neu roi Foregene Protease newydd yn ei le ar gyfer hydrolysis ensymatig.
5. Mae'r pecyn yn cael ei storio neu ei storio'n amhriodol am gyfnod rhy hir, gan achosi i rai cydrannau yn y pecyn fethu.
Argymhelliad: Prynu pecyn echdynnu DNA genomig planhigion newydd ar gyfer gweithrediadau cysylltiedig.
6. Defnydd amhriodol o'r pecyn.
Awgrym: Prynu Pecyn Ynysu DNA Planhigion wedi'i neilltuo ar gyfer samplau ar gyfer echdynnu a phuro DNA genomig planhigion.
7. Clustogi WB heb ychwanegu aanhydrus ethanol.
Argymhelliad: Gwnewch yn siŵr eich bod yn ychwanegu'r cyfaint cywir o ethanol absoliwt i Buffer WB.
8. Nid oedd yr eluent yn diferu ar y bilen silica yn gywir.
Awgrym: Ychwanegwch yr eluent wedi'i gynhesu ymlaen llaw yn 65℃dropwise i ganol y bilen gel silica, a'i adael ar dymheredd ystafell am 5 munud i gynyddu effeithlonrwydd elution.
Echdynnu i gael DNA genomig cynnyrch isel
1. Mae'r sampl yn cael ei storio neu ei storio'n amhriodol am gyfnod rhy hir, gan arwain at ddiraddio DNA genomig.
Argymhelliad: Storio samplau meinwe ar -20℃;ceisio defnyddio samplau meinwe sydd newydd eu casglu ar gyfer echdynnu DNA genomig.
2. Os yw swm y samplau meinwe yn rhy fach, bydd y DNA genomig a echdynnwyd yn llai.
Awgrym: Mae rhai samplau planhigion yn gyfoethog mewn dŵr, megis planhigion dyfrol fel algâu, ac ati, gellir cynyddu'r dos yn briodol neu gellir dadhydradu'r dŵr ychydig cyn y llawdriniaeth.
3. Nid oedd y samplau wedi'u malu'n drylwyr â nitrogen hylifol neu fe'u gadawyd ar dymheredd yr ystafell yn rhy hir ar ôl eu malu.
Awgrym: Rhaid i'r malu nitrogen hylifol fod yn ddigonol, a dylid torri'r wal gell sampl gymaint â phosibl;yn syth ar ôl y malu, dylid trosglwyddo'r powdr sampl i 65℃Clustogi PL1 wedi'i gynhesu ymlaen llaw ar gyfer y cam nesaf.
4. Peidio â defnyddio'r cit cywir.
Argymhelliad: Defnyddio Pecyn Ynysu DNA Planhigion pwrpasol i echdynnu a phuro DNA genomig planhigion.
5. Mae storio Foregene Protease yn amhriodol yn arwain at lai o weithgarwch neu anactifadu.
Argymhelliad: Cadarnhau amodau storio Foregene Protease neu roi Foregene Protease newydd yn ei le ar gyfer hydrolysis ensymatig.
6. Eluent broblem
Argymhelliad: Defnyddiwch Buffer EB ar gyfer elution;os yn defnyddio ddH2O neu eluents eraill, gwnewch yn siŵr bod pH yr eluent rhwng 7.0-8.5.
7. Nid yw'r eluent yn diferu'n gywir
Awgrym: Ychwanegwch y gostyngiad elution i ganol y bilen silica a'i adael ar dymheredd ystafell am 5 munud i gynyddu'r effeithlonrwydd elution.
8. Mae'r gyfrol eluent yn rhy fach
Awgrym: Defnyddiwch yr eluent ar gyfer elution DNA genomig yn ôl y cyfarwyddiadau, o leiaf dim llai na 100μl.
DNA genomig wedi'i dynnu â phurdeb isel
Bydd purdeb isel DNA genomig yn arwain at fethiant neu effaith wael arbrofion i lawr yr afon, megis: ni ellir torri'r ensym, ac ni ellir cael y darn genyn targed gan PCR.
1. Amrywiol halogiad protein, halogiad RNA.
Dadansoddiad: Ni ddefnyddiwyd byffer PW i olchi'r golofn;Ni ddefnyddiwyd byffer PW i olchi'r golofn ar y cyflymder allgyrchu cywir.
Awgrym: ceisiwch sicrhau nad oes dyodiad yn y supernatant pan fydd y supernatant yn mynd drwy'r golofn;gofalwch eich bod yn golchi'r golofn puro gyda Buffer PW yn unol â'r cyfarwyddiadau, ac ni ellir hepgor y cam hwn.
2. llygredd ïon amhuredd.
Dadansoddiad: Cafodd colofn golchi Buffer WB ei hepgor neu ei olchi unwaith yn unig, gan arwain at halogiad ïonig gweddilliol.
Argymhelliad: Gwnewch yn siŵr eich bod chi'n golchi ddwywaith gyda Buffer WB yn unol â'r cyfarwyddiadau i gael gwared ar ïonau gweddilliol cymaint â phosib.
3. Halogiad RNase.
Dadansoddiad: Mae RNase alldarddol yn cael ei ychwanegu at y Byffer;bydd gweithrediad golchi anghywir yn Buffer PW yn arwain at RNase gweddilliol ac yn effeithio ar weithrediadau arbrofol RNA i lawr yr afon, megis trawsgrifio in vitro.
Awgrym: Gall pecynnau echdynnu asid niwclëig cyfres Foregene gael gwared ar RNA heb RNase ychwanegol, ac nid oes angen RNase ar bob adweithydd yn Pecyn Ynysu DNA Planhigion;gofalwch eich bod yn golchi'r golofn puro gyda Buffer PW yn unol â'r cyfarwyddiadau, ac ni ellir hepgor y cam hwn.
4. Gweddillion ethanol.
Dadansoddiad: Ar ôl golchi'r golofn puro gyda Buffer WB, ni pherfformiwyd centrifugation tiwb gwag.
Argymhelliad: Dilynwch y cyfarwyddiadau ar gyfer centrifugio tiwb gwag iawn.
Llawlyfr cyfarwyddiadau:
Llawlyfr Cyfarwyddiadau Pecyn Ynysu DNA Planhigion
