Pecyn Ynysu RNA Cyfanswm Anifeiliaid Pecynnau Echdynnu a Phuro RNA Cyfanswm ar gyfer Meinweoedd Anifeiliaid a Chelloedd
Disgrifiad o'r pecyn:
Tynnu cyfanswm RNA purdeb uchel ac o ansawdd uchel yn gyflym ac yn effeithlon o wahanol feinweoedd anifeiliaid.
Nid oes angen poeni am ddiraddiad RNA.Mae'r system gyfan yn rhydd o RNase
Tynnwch DNA yn effeithiol gan ddefnyddio Colofn Glanhau DNA
Tynnwch DNA heb ychwanegu DNA
Syml - cwblheir pob gweithrediad ar dymheredd ystafell
Cyflym - gellir cwblhau gweithrediad mewn 30 munud
Diogel - dim adweithydd organig yn cael ei ddefnyddio
Purdeb uchel - OD260/280 ≈ 1.8-2.1
Disgrifiadau Citiau
50 Preps, 200 Preps
Mae'r pecyn hwn yn defnyddio'rcolofn troelli a fformiwlaa ddatblygwyd gan ein cwmni, sy'n gallu echdynnu RNA purdeb uchel ac o ansawdd uchel o feinweoedd anifeiliaid amrywiol gydag effeithlonrwydd uchel. Mae'n darparu Colofn Glanhau DNA effeithlon, sy'n gallu gwahanu ac arsugniad DNA genomig yn hawdd o'r lysate supernatant a meinwe, yn syml ac yn arbed amser;Gall Colofn RNA yn unig rwymo RNA yn effeithlon a gellir ei phrosesu ar yr un pryd â fformiwla unigryw Llawer o samplau.
Mae'r system gyfan yn rhydd o RNase, fel nad yw'r RNA a echdynnwyd yn cael ei ddiraddio;Clustogi RW1, system golchi byffer Buffer RW2, fel bod yr RNA a gafwyd yn rhydd o brotein, DNA, ïon, a llygredd cyfansawdd organig.
Cydrannau Kit
| Pecyn Ynysu RNA Cyfanswm Anifeiliaid | ||
| Cydrannau Kit | RE-03011 | AG-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Clustog RL1* | 25ml | 100ml |
| Clustog RL2 | 15ml | 60ml |
| Clustog RW1* | 25ml | 100ml |
| Clustog RW2 | 24ml | 96ml |
| RNase-Free ddH2O | 10ml | 40ml |
| Colofn RNA yn unig | 50 | 200 |
| Colofn Glanhau DNA | 50 | 200 |
| Llawlyfr Cyfarwyddiadau | 1 darn | 1 darn |
Gwybodaeth am gynnyrch
| Fformat | Colofn sbin | Cydran puro | Colofn Foregene, adweithydd |
| Fflwcs | 1-24 sampl | Amser fesul paratoad | ~30 munud (24 sampl) |
| Centrifuge | Centrifuge desg | Gwahaniad pyrolysis | Gwahaniad allgyrchol |
| Sampl | Meinwe anifeiliaid;cell | Swm samplau | Meinwe: 10-20 mg;Cell: (1-5) × 106 |
| Cyfrol elution | 50-200 μL | Uchafswm cyfaint llwytho | 850 μL |
Nodweddion a manteision
■ Nid oes angen poeni am ddiraddiad RNA;mae'r system gyfan yn rhydd o RNase
■ Cael gwared ar DNA yn effeithiol gan ddefnyddio Colofn Glanhau DNA
■ Tynnwch DNA heb ychwanegu DNA
■ Syml - cwblheir pob llawdriniaeth ar dymheredd ystafell
■ Cyflym - gellir cwblhau gweithrediad mewn 30 munud
■ Diogel - dim angen adweithydd organig
■ Purdeb uchel -OD260/280≈1.8-2.1
Cais cit
Mae'n addas ar gyfer echdynnu a phuro cyfanswm RNA o amrywiaeth o feinweoedd anifeiliaid ffres neu wedi'u rhewi neu gelloedd diwylliedig.
Paramedrau cynnyrch
■ Cymwysiadau i lawr yr afon: synthesis cDNA llinyn cyntaf, RT-PCR, clonio moleciwlaidd, Northern Blot, ac ati.
■ Samplau: meinweoedd anifeiliaid, celloedd diwylliedig
■ Dos: Meinweoedd 10-20mg, Celloedd (2-5) × 106
■ Cynhwysedd rhwymo DNA uchaf y golofn puro: 80 μg
■ Cyfrol elution: 50-200 μl
Diagram
Pecyn Ynysu RNA Cyfanswm Anifeiliaid wedi'i drin 20mg
Samplau llygoden ffres, cymerwch 5% puro cyfanswm RNA 1% agar
Electrofforesis Glycogel
1 : dueg 2 : arennau
3: Afu 4: Calon
Storio ac oes silff
Gellir storio'r pecyn am 24 mis ar dymheredd ystafell (15-25 ℃) neu 2-8 ℃ am amser hirach.Gellir storio byffer RL1 ar 4 ℃ am 1 mis ar ôl ychwanegu β- mercaptoethanol (dewisol).
Erthyglau wedi'u dyfynnu
1 .OS:18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.Nanoronynnau tebyg i Lipid â Llwyth mRNA ar gyfer Golygu Sylfaen Afu Trwy Optimeiddio Dyluniad Cyfansawdd Canolog.Adv.Funct.Mater.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068 .
2.OS:18.187:Mae X, Hong W, Yang J, et al.Mae apoptosis digymell o gelloedd wrth baratoi bôn-gelloedd therapiwtig yn cael effeithiau imiwnofodwlaidd trwy ryddhau ffosffatidylserine.Targed Trawsgludiad Signal Ther.2021 Gorff 14;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.OS:17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.Mae addasiad tRNA N7-Methylguanosine yn gwella cyfieithiad mRNA oncogenig ac yn hyrwyddo dilyniant colangiocarcinoma intrahepatig.Cell Mol.2021 Gorff 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.OS:9.225:Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Mae Addasiad Mettl14-M6A Mediated Yn Hwyluso Adfywio'r Afu trwy Gynnal Homeostasis Reticwlwm Endoplasmig.Cell Mol Hepatol Gastroenterol.2021; 12(2): 633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
Pecynnau arwahanu RNA ar gyfer ffynonellau sampl eraillar gael:
Cell, planhigyn, firaol, gwaed, ac ati.
Nid yw RNA yn cael ei dynnu neu mae cynnyrch RNA yn isel
Yn aml mae yna amrywiaeth o ffactorau sy'n effeithio ar effeithlonrwydd adferiad, megis: cynnwys RNA sampl meinwe, dull gweithredu, cyfaint elution, ac ati.
1. Perfformiwyd centrifugation bath iâ neu cryogenig (4 °C) yn ystod y llawdriniaeth.
Argymhelliad: Gweithredu ar dymheredd ystafell (15-25 ° C) trwy gydol y broses gyfan, peidiwch â bath iâ a centrifuge ar dymheredd isel.
2. Cadw sampl yn amhriodol neu amser storio sampl gormodol.
Argymhelliad: Storio samplau ar -80 ° C neu eu rhewi mewn nitrogen hylifol ac osgoi defnydd rhewi-dadmer dro ar ôl tro;ceisio defnyddio meinwe ffres neu gelloedd diwylliedig ar gyfer echdynnu RNA.
3. lysis sampl annigonol.
Argymhelliad: Wrth homogeneiddio meinwe, sicrhewch fod y meinwe wedi'i homogeneiddio'n ddigonol a bod y celloedd meinwe wedi'u hollti'n ddigonol i egluro rhyddhau RNA.
4. Ni ychwanegir yr eluent yn gywir.
Argymhelliad: Cadarnhau bod ddH Di-RNase2Ychwanegir O dropwise i ganol y bilen colofn puro.
5. Ni ychwanegwyd cyfaint cywir ethanol absoliwt at Buffer RL2 na Buffer RW2.
Argymhelliad: Dilynwch y cyfarwyddiadau, ychwanegwch y cyfaint cywir o ethanol absoliwt i Buffer RL2 a Buffer RW2 a chymysgwch yn dda cyn defnyddio'r pecyn.
6. Nid yw dos sampl meinwe yn briodol.
Argymhelliad: Defnyddiwch 10-20 mg o feinwe neu (1-5) × 106celloedd fesul 500 μl byffer RL1, gan y gall defnydd gormodol o feinwe arwain at lai o echdynnu RNA.
7. Cyfaint elution amhriodol neu elution anghyflawn.
Argymhelliad: Cyfrol elution y golofn puro yw 50-200 μl;os nad yw'r effaith elution yn foddhaol, argymhellir ymestyn yr amser lleoli tymheredd ystafell ar ôl ychwanegu ddH heb RNase wedi'i gynhesu ymlaen llaw2O, ee am 5-10 munud.
8.Mae gan y golofn puro weddillion ethanol ar ôl golchi Buffer RW2.
Argymhelliad: Os oes gweddillion ethanol ar ôl golchi Buffer RW2, centrifugio tiwb gwag am 1 munud, gellir cynyddu'r amser ar gyfer gweithrediad centrifugation tiwb gwag i 2min, neu gellir gosod y golofn puro ar dymheredd ystafell am 5 munud i gael gwared ar yr ethanol gweddilliol yn ddigonol.
Mae RNA wedi'i buro yn cael ei ddiraddio
Mae ansawdd yr RNA wedi'i buro yn gysylltiedig â ffactorau megis cadw'r sampl, halogiad RNase, a thrin, ac ati.
1. Ni chedwir samplau meinwe mewn pryd.
Argymhelliad: Os na ddefnyddir samplau meinwe neu gelloedd mewn modd amserol ar ôl eu casglu, ar unwaith cryopreserve ar -80 ° C neu nitrogen hylifol.I echdynnu RNA, defnyddiwch feinwe sydd newydd ei gymryd neu sampl o gelloedd pryd bynnag y bo modd.
2. Rhewi-dadmer dro ar ôl tro o samplau meinwe.
Argymhelliad: Wrth storio samplau meinwe, mae'n well eu torri'n ddarnau bach i'w cadw, a thynnu un o'r darnau wrth eu defnyddio i osgoi rhewi-dadmer dro ar ôl tro o'r sampl a diraddio RNA.
3. Mae RNase yn cael ei gyflwyno neu beidio â gwisgo menig tafladwy, masgiau, ac ati yn ystod y llawdriniaeth.
Argymhelliad: Mae arbrofion echdynnu RNA yn cael eu perfformio orau mewn ystafelloedd trin RNA ar wahân a bod y bwrdd yn cael ei glirio cyn yr arbrawf.
Gwisgwch fenig a masgiau tafladwy yn ystod yr arbrawf i leihau dirywiad RNA a achosir gan gyflwyniad RNase.
4. Mae adweithyddion wedi'u halogi â RNase yn ystod y defnydd.
Argymhelliad: Gosod Pecyn Ynysu RNA Cyfanswm Anifeiliaid newydd yn ei le ar gyfer arbrofion cysylltiedig.
5. Mae'r tiwbiau centrifuge, awgrymiadau, ac ati a ddefnyddir mewn trin RNA wedi'u halogi â RNase.
Argymhelliad: Cadarnhewch fod y tiwbiau centrifuge, y tomenni, y pibedau, ac ati a ddefnyddir i echdynnu RNA i gyd yn rhydd o RNase.
Mae RNA a gafwyd wedi'i buro yn effeithio ar arbrofion i lawr yr afon
RNA puro gan y golofn puro, os yw'r ïonau halen, bydd cynnwys protein yn rhy fawr yn effeithio ar yr arbrawf i lawr yr afon, megis: trawsgrifio gwrthdro, Northern Blot et al.
1. Mae gan yr RNA eliwiedig weddillion ïon halen.
Argymhelliad: Cadarnhau bod y cyfaint cywir o ethanol wedi'i ychwanegu at Buffer RW2 a pherfformio 2 olchi colofn puro ar y cyflymder allgyrchol a nodir ar gyfer gweithredu;os oes unrhyw weddillion ïon halen, gadewch y golofn puro i Buffer RW2 am 5 munud ar dymheredd yr ystafell a pherfformio centrifugio i gael gwared â halogiad halen i'r eithaf.
2. Gweddillion ethanol mewn RNA elutioned.
Argymhelliad: Cadarnhau, ar ôl golchi byffer RW2, cyflawni'r llawdriniaeth centrifugation tiwb gwag ar y cyflymder centrifugation a nodir ar gyfer gweithredu, cynyddu amser gweithrediad centrifugation tiwb gwag i 2 funud os oes gweddillion ethanol o hyd, neu ei adael ar dymheredd ystafell am 5 munud ar ôl y centrifugation tiwb gwag i wneud y mwyaf o gael gwared ar weddillion ethanol.
