Cell Cyfanswm Pecyn Ynysu RNA Cyfanswm Pecynnau Unigedd RNA Puro o'r gell
Disgrifiad o'r pecyn:
Gellir cael RNA pur iawn ac o ansawdd uchel o wahanol gelloedd diwylliedig mewn 11 munud.
RNase-Free
Wedi'i weithredu ar dymheredd ystafell (15-25 ℃)
Gyda Cholofn Glanhau DNA
Cynnyrch RNA uchel
Cyflym: Gorffen echdynnu mewn 11 munud
Diogelwch: Dim cemegol organig
Disgrifiad
Mae'r pecyn hwn yn defnyddio'r golofn sbin a'r fformiwla a ddatblygwyd gan Foregene, a all echdynnu cyfanswm RNA purdeb uchel ac o ansawdd uchel yn effeithlon o gelloedd wedi'u meithrin mewn platiau 96, 24, 12, a 6-ffynnon.
Mae'r pecyn yn darparu Colofn Glanhau DNA effeithlon, sy'n gallu gwahanu'r supernatant a'r lysate cell yn hawdd, rhwymo a thynnu DNA genomig.Mae'r llawdriniaeth yn syml ac yn arbed amser.
Tgall Colofn RNA yn unig rwymo RNA yn effeithlon â fformiwla unigryw.Gellir prosesu nifer fawr o samplau ar yr un pryd.
Cydrannau Kit
| Cyfansoddiad cit | AG-03111 | AG-03114 |
| 50 T | 200 T | |
| byffer cRL1* | 25 ml | 100 ml |
| byffer cRL2 | 15 ml | 60 ml |
| Clustog RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Clustog RW2 | 24 mL | 96 mL |
| RNase-Free ddH2O | 10 ml | 40 ml |
| Colofn RNA yn unig | 50 | 200 |
| Colofn Glanhau DNA | 50 | 200 |
| Cyfarwyddiad | 1 | 1 |
* Gwisgwch fenig a chymerwch fesurau amddiffynnol yn ystod y llawdriniaeth gan fod Buffer cRL1 a Buffer RW1 yn cynnwys halwynau chaotropig cythruddo.
Nodweddion a manteision
■ Mae'r broses gyfan yn cael ei gweithredu ar dymheredd ystafell (15-25 ℃), heb baddon iâ a centrifugio tymheredd isel.
■ Mae'r pecyn cyfan yn rhydd o RNase, nid oes angen poeni am ddiraddiad RNA.
■ Mae Colofn Glanhau DNA yn rhwymo DNA yn benodol, fel y gall y pecyn dynnu halogiad DNA genomig heb ychwanegu DNase ychwanegol.
■ Cynnyrch RNA uchel: Gall Colofn RNA yn unig a fformiwla unigryw buro RNA yn effeithlon.
■ Cyflymder cyflym: hawdd i'w weithredu a gellir ei gwblhau mewn 11 munud.
■ Diogelwch: Nid oes angen adweithydd organig.
■ Ansawdd uchel: Mae'r RNA puro o burdeb uchel, yn rhydd o brotein ac amhureddau eraill, a gall fodloni arbrofion amrywiol dilynol.
Cais cit
Mae'n addas ar gyfer echdynnu a phuro cyfanswm RNA o gelloedd diwylliedig mewn platiau 96, 24, 12, a 6-ffynnon.
Llif gwaith
Diagram
Mae'r diagram batri gel agarose o Cell Cyfanswm RNA Ynysu Kit trin y niferoedd gwahanol uchod o gelloedd, 20μl elution cyfaint, cymryd 2μl puro cyfanswm RNA 1%.
Storio ac oes silff
Gellir storio'r pecyn am 12 mis ar dymheredd ystafell (15-25 ℃) neu 2-8 ℃ am amser hirach (24 mis).
Gellir storio byffer cRL1 ar 4 ℃ am 1 mis ar ôl ychwanegu 2-hydroxy-1-ethanethiol (dewisol).
Nid yw RNA yn cael ei dynnu neu mae cynnyrch RNA yn isel
Yn aml mae yna amrywiaeth o ffactorau sy'n effeithio ar effeithlonrwydd adferiad, megis: cynnwys RNA sampl meinwe, dull gweithredu, cyfaint elution, ac ati.
1. Perfformiwyd centrifugation bath iâ neu cryogenig (4 °C) yn ystod y llawdriniaeth.
Argymhelliad: Gweithredu ar dymheredd ystafell (15-25 ° C) trwy gydol y broses gyfan, peidiwch â bath iâ a centrifuge ar dymheredd isel.
2. Cadw sampl yn amhriodol neu amser storio sampl gormodol.
Argymhelliad: Storio samplau ar -80 ° C neu eu rhewi mewn nitrogen hylifol ac osgoi defnydd rhewi-dadmer dro ar ôl tro;ceisio defnyddio meinwe ffres neu gelloedd diwylliedig ar gyfer echdynnu RNA.
3. lysis sampl annigonol.
Argymhelliad: Wrth homogeneiddio meinwe, sicrhewch fod y meinwe wedi'i homogeneiddio'n ddigonol a bod y celloedd meinwe wedi'u hollti'n ddigonol i egluro rhyddhau RNA.
4. Ni ychwanegir yr eluent yn gywir.
Argymhelliad: Cadarnhau bod ddH Di-RNase2Ychwanegir O dropwise i ganol y bilen colofn puro.
5. Ni ychwanegwyd cyfaint cywir ethanol absoliwt at Buffer RL2 na Buffer RW2.
Argymhelliad: Dilynwch y cyfarwyddiadau, ychwanegwch y cyfaint cywir o ethanol absoliwt i Buffer RL2 a Buffer RW2 a chymysgwch yn dda cyn defnyddio'r pecyn.
6. Nid yw dos sampl meinwe yn briodol.
Argymhelliad: Defnyddiwch 10-20 mg o feinwe neu (1-5) × 106celloedd fesul 500 μl byffer RL1, gan y gall defnydd gormodol o feinwe arwain at lai o echdynnu RNA.
7. Cyfaint elution amhriodol neu elution anghyflawn.
Argymhelliad: Cyfrol elution y golofn puro yw 50-200 μl;os nad yw'r effaith elution yn foddhaol, argymhellir ymestyn yr amser lleoli tymheredd ystafell ar ôl ychwanegu ddH heb RNase wedi'i gynhesu ymlaen llaw2O, ee am 5-10 munud.
8.Mae gan y golofn puro weddillion ethanol ar ôl golchi Buffer RW2.
Argymhelliad: Os oes gweddillion ethanol ar ôl golchi Buffer RW2, centrifugio tiwb gwag am 1 munud, gellir cynyddu'r amser ar gyfer gweithrediad centrifugation tiwb gwag i 2min, neu gellir gosod y golofn puro ar dymheredd ystafell am 5 munud i gael gwared ar yr ethanol gweddilliol yn ddigonol.
Mae RNA wedi'i buro yn cael ei ddiraddio
Mae ansawdd yr RNA wedi'i buro yn gysylltiedig â ffactorau megis cadw'r sampl, halogiad RNase, a thrin, ac ati.
1. Ni chedwir samplau meinwe mewn pryd.
Argymhelliad: Os na ddefnyddir samplau meinwe neu gelloedd mewn modd amserol ar ôl eu casglu, ar unwaith cryopreserve ar -80 ° C neu nitrogen hylifol.I echdynnu RNA, defnyddiwch feinwe sydd newydd ei gymryd neu sampl o gelloedd pryd bynnag y bo modd.
2. Rhewi-dadmer dro ar ôl tro o samplau meinwe.
Argymhelliad: Wrth storio samplau meinwe, mae'n well eu torri'n ddarnau bach i'w cadw, a thynnu un o'r darnau wrth eu defnyddio i osgoi rhewi-dadmer dro ar ôl tro o'r sampl a diraddio RNA.
3. Mae RNase yn cael ei gyflwyno neu beidio â gwisgo menig tafladwy, masgiau, ac ati yn ystod y llawdriniaeth.
Argymhelliad: Mae arbrofion echdynnu RNA yn cael eu perfformio orau mewn ystafelloedd trin RNA ar wahân a bod y bwrdd yn cael ei glirio cyn yr arbrawf.
Gwisgwch fenig a masgiau tafladwy yn ystod yr arbrawf i leihau dirywiad RNA a achosir gan gyflwyniad RNase.
4. Mae adweithyddion wedi'u halogi â RNase yn ystod y defnydd.
Argymhelliad: Gosod Pecyn Ynysu RNA Cyfanswm Anifeiliaid newydd yn ei le ar gyfer arbrofion cysylltiedig.
5. Mae'r tiwbiau centrifuge, awgrymiadau, ac ati a ddefnyddir mewn trin RNA wedi'u halogi â RNase.
Argymhelliad: Cadarnhewch fod y tiwbiau centrifuge, y tomenni, y pibedau, ac ati a ddefnyddir i echdynnu RNA i gyd yn rhydd o RNase.
Mae RNA a gafwyd wedi'i buro yn effeithio ar arbrofion i lawr yr afon
RNA puro gan y golofn puro, os yw'r ïonau halen, bydd cynnwys protein yn rhy fawr yn effeithio ar yr arbrawf i lawr yr afon, megis: trawsgrifio gwrthdro, Northern Blot et al.
1. Mae gan yr RNA eliwiedig weddillion ïon halen.
Argymhelliad: Cadarnhau bod y cyfaint cywir o ethanol wedi'i ychwanegu at Buffer RW2 a pherfformio 2 olchi colofn puro ar y cyflymder allgyrchol a nodir ar gyfer gweithredu;os oes unrhyw weddillion ïon halen, gadewch y golofn puro i Buffer RW2 am 5 munud ar dymheredd yr ystafell a pherfformio centrifugio i gael gwared â halogiad halen i'r eithaf.
2. Gweddillion ethanol mewn RNA elutioned.
Argymhelliad: Cadarnhau ar ôl golchi byffer RW2, cyflawni'r llawdriniaeth centrifugation tiwb gwag ar y cyflymder centrifugation a nodir ar gyfer gweithredu, cynyddu amser gweithrediad centrifugation tiwb gwag i 2 funud os oes gweddillion ethanol o hyd, neu ei adael ar dymheredd ystafell am 5 m
