Pecyn Ynysu DNA Swab Buccal/Cerdyn FTA Echdynnu DNA Genomig neu Becyn Puro o Swabs Buccal
Disgrifiad o'r pecyn:
Puro DNA genomig o ansawdd uchel yn gyflym o samplau swab buccal / Cerdyn FTA.
◮Dim halogiad RNase:Mae'r Golofn DNA yn Unig a ddarperir gan y pecyn yn ei gwneud hi'n bosibl tynnu'r RNA o'r DNA genomig heb ychwanegu RNase yn ystod yr arbrawf, gan atal y labordy rhag cael ei halogi gan RNase alldarddol.
◮Cyflymder cyflym:Mae gan Foregene Protease weithgaredd uwch na phroteasau tebyg, ac mae'n treulio samplau meinwe yn gyflym;mae'r llawdriniaeth yn syml, a gellir cwblhau'r gweithrediad echdynnu DNA genomig o fewn 20-80 munud.
◮Cyfleus:Mae'r centrifugation yn cael ei berfformio ar dymheredd ystafell, ac nid oes angen allgyrchiant tymheredd isel 4 ° C na dyddodiad ethanol o DNA.
◮Diogelwch:Nid oes angen echdynnu adweithydd organig.
◮Ansawdd uchel:Mae gan y DNA genomig a echdynnwyd ddarnau mawr, dim RNA, dim RNase, a chynnwys ïon hynod o isel, a all fodloni gofynion amrywiol arbrofion.
◮System ficro-elution:Gall gynyddu crynodiad DNA genomig, sy'n gyfleus ar gyfer canfod neu arbrofi i lawr yr afon.
Disgrifiad
Mae'r pecyn hwn yn darparu dull effeithlon a chyflym o gael DNA genomig crynodiad uchel o swabiau buccal a Cherdyn FTA (smotiau gwaed).Defnyddio ein cwmni's colofn a fformiwla sbin bilen silica unigryw DNA yn unig, ynghyd â Foregene Protease, gellir echdynnu DNA genomig crynodiad uchel o ansawdd uchel mewn 80 munud.Mae'r golofn buro fach a ddyluniwyd yn arbennig yn rhwymo DNA genomig, a gellir osgoi'r DNA gydag ychydig bach (15μl) system elution i gynyddu crynodiad y DNA genomig a gafwyd, sy'n gyfleus ar gyfer canfod neu arbrofi i lawr yr afon.Gall y pecyn brosesu un neu fwy o samplau ar y tro, ac nid yw'r broses buro yn gofyn am echdynnu sylweddau organig fel ffenol, clorofform, a dyddodiad isopropanol neu ethanol sy'n cymryd llawer o amser, ac mae'r llawdriniaeth yn syml ac yn arbed amser.
Manylebau
50 Preps
Cydrannau Kit
| Clustog ST1 |
| Clustog ST2 |
| Acrylamid llinol |
| Clustog PW |
| Clustog WB |
| Clustog EB |
| Foregene Protease |
| Colofn DNA yn unig |
| Cyfarwyddiadau |
Nodweddion a manteision
-Dim halogiad RNase: Mae'r Golofn DNA-Unig a ddarperir gan y pecyn yn ei gwneud hi'n bosibl tynnu RNA o DNA genomig heb ychwanegu RNase yn ystod yr arbrawf, gan osgoi'r labordy rhag cael ei halogi gan RNase alldarddol.
-Cyflymder cyflym: Mae gan Foregene Protease weithgaredd uwch na phroteasau tebyg, mae'n treulio samplau yn gyflym;gweithrediad syml.
-Cyfleus: Mae'r centrifugation yn cael ei berfformio ar dymheredd ystafell, ac nid oes angen allgyrchiant tymheredd isel 4 ° C na dyddodiad ethanol o DNA.
-Diogelwch: Nid oes angen echdynnu adweithydd organig.
-Ansawdd uchel: Mae gan y DNA genomig a echdynnwyd ddarnau mawr, dim RNA, dim RNase, a chynnwys ïon hynod o isel, a all fodloni gofynion amrywiol arbrofion.
-System micro-elution: Gall gynyddu crynodiad DNA genomig, sy'n gyfleus ar gyfer canfod neu arbrofi i lawr yr afon.
Cais cit
Mae'n addas ar gyfer puro DNA genomig o'r samplau canlynol: swabiau buccal, Cerdyn FTA (staeniau gwaed).
Storio ac Oes Silff
-Gellir storio'r pecyn hwn am 12 mis o dan amodau sych ar dymheredd ystafell (15-25 ° C);os oes angen ei storio am gyfnod hirach o amser, gellir ei storio ar 2-8 ° C.
Nodyn: Os caiff ei storio ar dymheredd isel, mae'r hydoddiant yn dueddol o wlybaniaeth.Cyn ei ddefnyddio, gwnewch yn siŵr eich bod chi'n gosod yr hydoddiant yn y pecyn ar dymheredd yr ystafell am gyfnod o amser.Os oes angen, cynheswch ef ymlaen llaw mewn baddon dŵr 37°C am 10 munud i doddi’r gwaddod, a’i gymysgu cyn ei ddefnyddio.
-Mae gan ateb Foregene Protease fformiwla unigryw, sy'n weithredol pan gaiff ei storio ar dymheredd yr ystafell am amser hir (3 mis);bydd ei weithgaredd a'i sefydlogrwydd yn well pan gaiff ei storio ar 4 ° C, felly argymhellir ei storio ar 4 ° C, cofiwch beidio â'i gadw ar -20 ° C.
Mae'r golofn puro yn rhwystredig
Yn y pecyn hwn, yn y gweithrediad echdynnu DNA genomig, mae'r golofn puro yn cael ei arsugnu'n uniongyrchol ar y cymysgedd lysis enzymatig sampl heb gam centrifugio, a gall y golofn puro gael ei rhwystro oherwydd enzymization anghyflawn a gludedd uchel y sampl.
Mae'r achosion posibl canlynol fel a ganlyn:
1. Treuliad ensymatig anghyflawn o samplau meinwe.
Argymhelliad: Gellir ymestyn amser prosesu sampl Foregene Protease yn briodol neu gellir cymryd y supernatant ar ôl centrifugation ar 12,000 rpm (~ 13,400 × g) am 5 munud.
2. Defnydd gormodol o samplau meinwe neu feinweoedd mawr.
Argymhelliad: Mae'n well peidio â bod yn fwy nag 1 swab Buccal yn y sampl;os yw'r sampl yn rhy fawr, cynyddwch y dos o Buffer ST1, Foregene Protease, byffer ST2 yn unol â hynny.
3. y gludedd sampl yn rhy uchel.
Argymhelliad: Gellir gwanhau samplau yn briodol gyda 10 mM o Tris-HCl cyn echdynnu DNA genomig.
4. Mae darnau o'r cerdyn gwaed wedi'u sugno.
Argymhelliad: Gellir ymestyn amser centrifugation dros dro cam 6 o echdynnu genomig sbot gwaed (Cerdyn FTA) yn briodol.
Cnwd isel neu ddim DNA
Yn aml mae amrywiaeth o ffactorau sy'n effeithio ar gynnyrch DNA genomig, gan gynnwys tarddiad sampl, amodau storio sampl, paratoi sampl, trin, ac ati.
Ni ellir cael DNA genomig yn ystod echdynnu
Mae'r achosion posibl fel a ganlyn:
1. Mae cadw samplau yn amhriodol neu eu storio am gyfnod rhy hir yn arwain at ddiraddio DNA genomig.
Argymhelliad: Yn ddelfrydol, dylid samplu swabiau geneuol yn ffres, ac nid yw'n ddoeth defnyddio swabiau cadw ar gyfer gweithrediadau echdynnu DNA genomig;dylai samplau sbot gwaed sicrhau bod yr ansawdd yn gymwys ac ni ddylai'r amser storio fod yn rhy hir.
2. Gall defnydd rhy ychydig o feinwe arwain at ddim echdynnu'r DNA genomig cyfatebol.
Argymhelliad: Dilynwch y cyfarwyddiadau samplu swab buccal yn y canllaw llawdriniaeth, a sychwch gymaint o weithiau â phosibl fel y gellir cysylltu digon o gelloedd â'r swab llafar ar gyfer echdynnu DNA genomig;ar gyfer echdynnu sampl sbot gwaed, gellir cynyddu'r ardal torri sbot gwaed yn briodol.
3. Mae Foregene Proteas wedi'i gadw'n amhriodol, gan arwain at leihad yn ei weithgarwch neu ei anactifadu.
Argymhelliad: Cadarnhau amodau storio'r Foregene Protease neu roi Foregene Protease newydd yn ei le ar gyfer adwaith ensymatig.
4. Mae cadw'r pecyn neu'r amser storio yn amhriodol yn rhy hir, gan arwain at fethiant rhai cydrannau yn y pecyn.
Argymhelliad: Prynu pecyn ynysu DNA swab Buccal newydd ar gyfer gweithdrefnau cysylltiedig.
5. Nid yw Buffer WB yn ychwanegu ethanol absoliwt.
Argymhelliad: Cadarnhewch fod byffer WB yn ychwanegu'r cyfaint cywir o ethanol absoliwt.
6. Nid yw'r eluent yn cael ei ychwanegu'n gywir at y ffilm silicon.
Argymhelliad: Ychwanegu diferion eluent cyn-gynhesu 65 °C i ganol y bilen silicon a'u gadael ar dymheredd ystafell am 5 munud i gynyddu'r effeithlonrwydd elution.
DNA genomig cynnyrch isel wedi'i ynysu
Mae'r achosion posibl canlynol fel a ganlyn:
1. Mae cadw samplau yn amhriodol neu eu storio am gyfnod rhy hir yn arwain at ddiraddio DNA genomig.
Argymhelliad: Yn ddelfrydol, mae swabiau geneuol yn cael eu samplu'n ffres, ac ni ddylid defnyddio swabiau wedi'u cadw ar gyfer echdynnu DNA genomig.
2. Os yw maint y sampl meinwe yn rhy fach, bydd y cynnwys DNA genomig a echdynnwyd yn llai.
Argymhelliad: Dilynwch y cyfarwyddiadau samplu swab llafar yn y canllaw gweithredu, gan sychu cymaint o weithiau â phosib fel y gellir cysylltu digon o gelloedd â'r swab llafar ar gyfer echdynnu DNA genomig.
3. Mae Foregene Proteas wedi'i gadw'n amhriodol, gan arwain at leihad yn ei weithgarwch neu ei anactifadu.
Argymhelliad: Cadarnhau amodau storio'r Foregene Protease neu roi Foregene Protease newydd yn ei le ar gyfer adwaith ensymatig.
4. Problemau eluent.
Argymhelliad: Defnyddio Buffer EB ar gyfer elution;os yn defnyddio ddH2O neu eluents eraill, cadarnhewch fod pH yr eluate rhwng 7.0-8.5.
5. Nid yw'r eluate yn cael ei ychwanegu dropwise yn gywir.
Argymhelliad: Ychwanegu diferion eluent i ganol y bilen silicon a gadael ar dymheredd ystafell am 5 munud i gynyddu effeithlonrwydd elution.
6. Mae'r hylif elution yn cronni rhy ychydig.
Argymhelliad: Defnyddiwch eluent ar gyfer elution DNA genomig fel sy'n ofynnol yn y cyfarwyddiadau, o leiaf dim llai na 15 μl.
Purdeb isel DNA genomig ynysig
Gall purdeb DNA genomig isel arwain at fethiant neu ganlyniadau anfoddhaol o arbrofion i lawr yr afon, megis: ni ellir torri ensymau yn agored, ni all PCR gael y darn genyn o ddiddordeb, ac ati.
Mae'r achosion posibl fel a ganlyn:
1. Llygredd heteroprotein, llygredd RNA.
Dadansoddiad: Ni chafodd y golofn puro ei olchi gan ddefnyddio Buffer PW;ni chafodd colofn puro golchi PW Clustog ei olchi gan ddefnyddio'r cyflymder allgyrchol cywir.
Argymhelliad: Sicrhewch nad oes unrhyw wlybaniaeth yn yr uwchnatur cyn ychwanegu ethanol;gofalwch eich bod yn golchi'r golofn puro yn unol â'r cyfarwyddiadau, ac ni ellir hepgor y cam hwn.
2. llygredd ïon amhuredd.
Dadansoddiad: Cafodd colofn puro golchi Clustog WB ei hepgor neu ei olchi unwaith yn unig, gan arwain at halogiad ïonig gweddilliol.
Argymhelliad: Gwnewch yn siŵr eich bod yn golchi Buffer WB 2 gwaith yn ôl y cyfarwyddyd i gael gwared ar ïonau gweddilliol cymaint â phosib.
3. RNA halogiad ensym.
Dadansoddiad: Ychwanegwyd RNasau Tramor i'r byffer;Roedd gweithrediad golchi PW byffer yn anghywir, gan arwain at weddillion RNase, gan effeithio ar weithrediadau arbrofol RNA i lawr yr afon, megis trawsgrifio in vitro.
Argymhelliad: Gall pecynnau ynysu asid niwclëig cyfres Foregene gael gwared ar RNA heb ychwanegu RNase ychwanegol, felly nid oes angen i Becyn Ynysu DNA Cerdyn Swab/FTA buccal ychwanegu RNase;gofalwch eich bod yn dilyn y cyfarwyddiadau ar gyfer Colofn puro golchi Buffer PW, ac ni ellir hepgor y cam hwn.
4. Gweddillion ethanol.
Dadansoddiad: Ni pherfformiodd Buffer WB centrifugation tiwb gwag ar ôl golchi'r golofn puro.
Argymhelliad: Perfformiwch y gweithrediad centrifugation tiwb gwag cywir yn unol â'r cyfarwyddiadau.
5. Llygredd amhuredd arall.
Dadansoddiad: Nid yw samplau wedi'u cadw neu samplau arbennig yn cael eu rhag-drin.
Argymhelliad: Rhag-driniwch y sampl yn drylwyr yn unol â'r cyfarwyddiadau.
