Pecyn RT-qPCR Uniongyrchol
Disgrifiad
Mae Pecyn RT-qPCR Uniongyrchol yn darparu byffer RT-qPCR wedi'i becynnu ar wahân ac ensym effeithlon uchelcymysgedd (Taq 、 M-MLV 、 RI), gan ei gwneud yn gyfleus ar gyfer creu citiau pen ôl a systemaddasiad, o fewn dilysu syml.
Manylebau
500T, 50,000T
Cydrannau Kit
Cynnwys y pecyn (System adwaith 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
500 T | 50,000 T | |
Cymysgedd Ensym Uniongyrchol | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
2 × Clustogi RT-qPCR Uniongyrchol | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
Cyfarwyddiad | 1 | 1 |
Camau Gweithredu
Cyn paratoi'r adweithydd, dylid dadmer yr holl adweithyddion yn y pecyn ar dymheredd yr ystafell a'u cymysgu'n ysgafn.
A: Paratoi of templed a adweithydd
1. Paratoi templed RNA parod (Argymhellir defnyddio pecyn cyfres Foregene Total RNA Arwahanu Kit i echdynnu a phuro templed RNA) neu sampl o gynnyrch cracio (Argymhellir defnyddio system Foregene Lysis), paent preimio penodol (10 μM) a nwyddau traul perthnasol eraill, offeryn.
2. Rhowch y Byffer RT-qPCR Uniongyrchol 2 ×, ddH2O Di-RNase a Lliw Cyfeirio 20 × ROX (os yw's sydd eu hangen) yn y blwch gyda rhew, gan wneud y rhain yn toddi yn naturiol, ac yn gymysg yn ysgafn.
B: Paratoi of RT-qPCR system
Bwrdd 1 : Paratoi of RT-qPCR system
Cydran | Cyfrol | Crynodiad terfynol |
2 × Clustogi RT-qPCR Uniongyrchol | 10 μL | 1 × |
Cymysgedd Ensym Uniongyrchol | 1μL | |
Ymlaen Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
Preimiwr Gwrthdro(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
Profi(4 μM) | 1μL | 200nM |
Templed(RNA neu Lysate) | X μL | |
Lliw Cyfeirnod 20 × ROX | - | 1* |
RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
Cyfanswm Cyfrol | 20μL |
C: Gosod yr RT-qPCR adwaith rhaglen
Bwrdd 2 : RT-qPCR adweithion rhaglen gosodiad (canys enghraifft: dwy-cam dull)
Cam | Tymheredd | Amser | Beiciau | Cynnwys | |
1 | 50 ℃ | 15 mun | 1* | 1 | Trawsgrifiad o'r cefn |
2 | 95 ℃ | 1 mun | 1 | Cyn-denatureiddio | |
3 | 95 ℃ | 10 eiliad | 40-45 | Dadnatureiddio | |
60 ℃ | 30 eiliad 2* | Anneal / Estyniad |
Storio ac Oes Silff
-Dylid storio'r pecyn ar -20± 5℃.Y cyfnod dilysrwydd yw 12 mis.
-Osgoi cylchoedd rhewi-dadmer dro ar ôl tro (<5 cylch).