Uniongyrchol RT-qPCR Kit II
Disgrifiad o'r pecyn:
◮Mae Pecyn RT-qPCR Uniongyrchol, gan ddefnyddio Foreasy Reverse Transcriptase a Foreasy HS Taq DNA Polymerase yn datblygu gan Foregene, gyda byffer adwaith unigryw, yn gwneud y pecyn hwn â gwrthiant cryf a chydnawsedd, a gall brofi'n uniongyrchol y defnydd o adwaith system Foregene Lysis fel templed.Gall y pecyn hwn wneud cais am becyn canfod asid niwclëig COVID-19 a datblygiad pecyn canfod asid niwclëig bacteria pathogenig eraill.
Disgrifiad
Mae Pecyn RT-qPCR Uniongyrchol yn darparu byffer RT-qPCR wedi'i becynnu ar wahân, Polymerase DNA Taq Foreasy HS effeithlon uchela Foreasy Reverse Transcriptase(MMLV),gan ei gwneud yn gyfleus ar gyfer creu pecynnau pen ôl ac addasu system, o fewn dilysu syml.
Mae Pecyn RT-qPCR Uniongyrchol, gan ddefnyddio Foreasy Reverse Transcriptase a Foreasy HS Taq DNA Polymerase yn datblygu gan Foregene, gyda byffer adwaith unigryw, yn gwneud y pecyn hwn â gwrthiant cryf a chydnawsedd, a gall brofi'n uniongyrchol y defnydd o adwaith system Foregene Lysis fel templed.Gall y pecyn hwn wneud cais am becyn canfod asid niwclëig COVID-19 a datblygiad pecyn canfod asid niwclëig bacteria pathogenig eraill.
Gall y pecyn hwn fod yn gydran o'r cynnyrch IVD yn uniongyrchol, gan ddefnyddio'n hawdd ac yn gyflym.Dim ond gwirio hawdd sydd ei angen, heb ddatblygu eto.
Manylebau
500T, 50,000T
Cydrannau Kit
| Cynnwys y pecyn (System adwaith 20 μL) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Foreasy Radnod Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 ml×5 |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 100 μL×1 | 1 ml×10 |
| 2 × RT-qPCR Uniongyrcholbyffer | 1 ml × 5 | 500 ml × 1 |
| Cyfarwyddiad | 1 | 1 |
Camau Gweithredu
A: Paratoi templed ac adweithydd
1. Paratoi templed RNA parod (Argymhellir defnyddio pecyn cyfres Foregene Total RNA Arwahanu Kit i echdynnu a phuro templed RNA) neu sampl o gynnyrch cracio (Argymhellir defnyddio system Foregene Lysis), paent preimio penodol (10 μM) a nwyddau traul perthnasol eraill, offeryn.
2. Rhowch y 2 × Clustog RT-qPCR Uniongyrchol, ddH2O Di-RNase a 20 × ROX Reference Dye (os oes angen) yn y blwch gyda rhew, gan wneud i'r rhain doddi'n naturiol, a chymysgu'n ysgafn.
B: Paratoi system RT-qPCR
Cael hanner maint byffer adwaith system adwaith (er enghraifft, os yw cyfaint y system yn 20 μL, mae angen iddo gael 10 μL 2 × Clustogfa RT-qPCR Uniongyrchol). Canysswm cyfatebol o ensym, rydym yn awgrymu hynnyM-MLV: system adwaith 10-30 U / 20 μL,TaqDNA polymeras:System adwaith 1-2 U/20 μLdyma ein hawgrym, dylech ei brofi a'i addasu), ychwanegu templed RNA, paent preimio a stilwyr penodol, ac ychwanegu ddH Heb RNase2O i 20 μL.Gellir cyfeirio'r paratoad penodol o system adwaith RT-qPCR at y tabl canlynol 1.
Tabl 1 : Paratoi system RT-qPCR
| Cydran | Cyfrol | Crynodiad terfynol |
| 2 × Clustogi RT-qPCR Uniongyrchol | 10 μL | 1 × |
| Trawsgrifiad Gwrthdroi Foreasy(MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 U | |
| Ymlaen Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Preimiwr Gwrthdro(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Profi(4 μM) | 1 μL | 200nM |
| Templed(RNA neu Lysate) | X μL | |
| 20 × ROX Cyfeirnod Lliw | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Cyfanswm Cyfrol | 20 μL |
Nodyn: Mae Forward Primer a Reverse Primer yn breimwyr penodol o'r genyn targed.Gellid addasu system y qPCR yn ôl modelau arbrofol ymarferol a PCR.Rydym yn argymell 400nM ar gyfer crynodiad terfynol y rhan fwyaf o preimwyr.Addaswch gyfaint y paent preimio a'r stilwyr penodol yn ôl y crynodiad a baratowyd a'r crynodiad terfynol a argymhellir, os gwelwch yn dda.
1*: Dewiswch grynodiad terfynol addas o ROX Reference Dye yn ôl gwahanol offerynnau PCR meintiol.Dangosir y crynodiad ROX Reference Dye gorau posibl o offerynnau PCR meintiol cyffredin yn y tabl a ganlyn:
| Offerynnau PCR meintiol | Crynodiad terfynol o ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Cam Un,etc. | 1 × (er enghraifft, ychwanegu Lliw Cyfeirio 1μl 20 × ROX mewn system adwaith 20 μL) |
| ABI 7500, 7500 Cyflym, Stratagene Mx3000P, Mx3005P a Mx4000, ac ati. | 0.5 × (er enghraifft, ychwanegwch 0.5μl 20 × ROX Cyfeirnod Lliw mewn system adwaith 20 μL) |
| Offeryn PCR Roche, offeryn PCR Bio-Rad, offeryn PCR meintiol Eppendorf, ac ati. | Heb ROX Cyfeirnod Dye |
Storio ac Oes Silff
Dylid storio'r pecyn ar -20 ± 5 ℃.Dylid ei storio ar unwaith mewn oergell thermostatig -20 ℃.Y cyfnod dilysrwydd yw 2 flynedd os caiff ei storio mewn cyflwr addas.
